恒兴生物分析方法分享 | 人血浆中硝酸异山梨酯的LC-MS/MS分析方法
来源：恒兴医药
一种重要的药物——硝酸异山梨酯
硝酸异山梨酯（英文：Isosorbide dinitrate）, ISDN，是一种硝酸类血管扩张剂，用于治疗心绞痛，充血性心力衰竭和食管痉挛。
硝酸异山梨酯被列入了世界卫生组织基本药物标准清单，是最重要的基本健康药物之一。
硝酸异山梨酯生物样本分析的复杂性
话说，单纯检测生物样本中硝酸异山梨酯与其它药品的检测并没有太大的差别，关键是口服硝酸异山梨酯在人体内会代谢出5-单硝酸异山梨酯和2-单硝酸异山梨酯两种活性产物，有一种也就算了，关键是有两种！所以硝酸异山梨酯BE临床试验需考察硝酸异山梨酯和代谢物2-单硝酸异山梨酯和5-单硝酸异山梨酯三个成分在人血浆中浓度，且看下方指导原则~
并且，三个检测对象均为保留弱、信号响应差的化合物！
还有，检测所用的离子对完全一样，5-单硝酸异山梨酯及2-单硝酸异山梨酯需要实现完全的液相分离！（请看下图的5-单硝酸异山梨酯及2-单硝酸异山梨酯的结构式，是不是有点傻傻分不清楚？）
这还不算，原形药及代谢物2-单硝酸异山梨酯在体内的浓度较低，检测灵敏度要求很高！并且FDA指导原则建议检测的样本口服剂量为30mg，而国内厂家更倾向于5-10mg！
目前的公开文献中，未见同时测定硝酸异山梨酯、2-单硝酸异山梨酯和5-单硝酸异山梨酯的LC-MS/MS方法……
找到满足厂家要求的的检测方法难度很高有没有！
一开始我们也是一筹莫展滴~~~心理状态下图能够说明滴~~~
然而——方法我们最终找到了！
经过坚持不懈的努力，我们终于将难点各个击破，实现了三种化合物的同时检测，实现了5-单硝酸异山梨酯及2-单硝酸异山梨酯的液相分离，三种化合物的线性范围分别为0.25～80/1.5～240/1～160 ng/mL（硝酸异山梨酯/2-单硝酸异山梨酯/5-单硝酸异山梨酯），典型色谱图在下方~~~
经过验证，我们的方法具有良好的精密度准确度以及稳定性和耐用性
在方法摸索过程中，为了增加保留程度及分离度，我们取用了较长的色谱柱；另外，我们采用醋酸根加合离子作为母离子来建立检测通道，极大地增强了质谱信号；还有，我们采用了高倍浓缩的液液萃取法，并最大限度地优化和消除了基质的干扰；针对取样过程中的稳定性（全血稳定性），我们进行了详细的考察，并摸索出了保证全血稳定性的采样程序。自此，对于硝酸异山梨酯的检测，我们终于可以说So easy~~~
一起来了解一下我们恒兴医药吧~~~~
郭建军
— 恒兴医药总经理 —
武汉大学博士、德国康斯坦茨大学访问学者、中国药理学会药代专委会企业组委员，在生物医药领域拥有近15年的研究和管理经验，擅长于药代动力学（DMPK）、生物分析、分离科学质谱定性及定量分析、蛋白质组学等方面的研究。目前已发表近20篇SCI论文及综述，参与了一部英文科技书籍的编写，获得8项中国国家发明和实用新型专利。 先后获得 ”江苏省企业博士集聚计划” 、“江苏省第五期333工程”、 苏州市“吴中区现代服务业人才项目” 、长沙市高新区“555人才”、长沙市“省市级领军人才”等荣誉和奖励。
恒兴医药全体成员
这是一支朝气蓬勃、充满活力、学历高、技术能力强的研发团队，其中一半以上拥有硕士及以上学历，并且不乏经历多次CFDA现场核查并具备多年临床样本分析经验的专业人才。一直以来，大家精益求精，不断地提升自身能力水平并完善着我们的质量管理体系，尽力为客户提供优质的服务和客观准确的检测结果。
